| 七、血脂测定方法与临床意义
(一)TC测定
1.方法
血清TC测定一般用酶法如胆固醇氧化酶-过氧化物酶-4-氨基安替比林和酚法(CHOD-PAP法)作为临床实验室测定血清TC的常规方法。TC水平因生活条件(饮食、运动等)而异,随年龄上升,70岁以后有下降趋势。中青年男性略高于女性,但绝经期后女性高于同龄男性。高胆固醇血症和AS的发生有密切关系,已通过动物实验、人体动脉粥样斑块的组织病理学和化学研究、临床上AS患者的血脂检查、遗传性高脂血症易早发冠心病、流行病学研究、干预性预防治疗试验的结果等研究证实。因此认为胆固醇是AS的重要危险因素之一。
2.临床意义
常用作AS预防、发病估计、治疗观察等的参考指标。TC升高可见于各种高脂蛋白血症、梗阻性黄疸、肾病综合征、甲状腺功能低下、慢性肾功能衰竭、糖尿病等时。此外,吸烟、饮酒、紧张、血液浓缩等也都可使TC升高。妊娠末3个月时,可能明显升高,产后恢复原有水平。TC降低可见于各种脂蛋白缺陷状态、肝硬化、恶性肿瘤、营养不良、巨细胞性贫血等。此外,女性月经期也可降低。
(二)TG测定
1.方法
TG又称中性脂肪。TG水平与种族、年龄、性别以及生活习惯(如饮食、运动等)有关。我国人的TG水平显著低于欧美白人。应注意TG水平的个体内与个体间变异都比TC大,人群调查数据比较分散,呈明显的正偏态分布。目前建议甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶-4-氨基安替比林和酚法(GPO-PAP法)作为临床实验室测定血清TG的常规方法。一般临床实验室可采用一步GPO-PAP法,有条件的实验室(如三级以上医院)应考虑开展游离甘油的测定或采用两步酶法。
2.临床意度
TG升高可见于家族性高TG血症、家族性混合性高脂血症、冠心病、动脉粥样硬化、糖尿病、肾病综合症、甲状腺功能减退、胆道梗塞、糖原累积症、妊娠、口服避孕药、酗酒、急性胰腺炎[>1000mg/dl(11.3mmol/L)」。前瞻性研究分析显示高TG也是冠心病的独立危险因子。虽然继发性或遗传性因素可升高TG水平,但临床中大部分血清TG升高见于代谢综合征。TG降低可见于慢性阻塞性肺疾患、脑梗死、甲状腺功能亢进、甲状旁腺功能亢进、营养不良、吸收不良综合症、先天性a-β脂蛋白血症等。还可见于过度饥饿、运动等。
(三)HDL-C测定
1.方法
许多因素影响HDL-C的水平,包括家族史、年龄、性别、遗传、吸烟、运动、饮食习惯、肥胖和某些药物。目前建议用双试剂的直接匀相测定法(homogeneous method)作为临床实验室测定血清HDL-C的常规方法。
2.临床意义
流行病学研究表明HDL-C与冠心病的发展成负相关关系,HDL-C值低的个体患冠心病的危险性增加,相反HDL-C水平高者,患冠心病的可能性小,所以HDL-C可用于评价患冠心病的危险性。近来,ATP III将HDL-C<1.03mmol/L(40mg/dl)定为低HDL-C,这一改变反映了低HDL重要性的新研究结果和低HDL与心脏病之间的联系。HDL-C降低还可见于急性感染、糖尿病、慢性肾功能衰竭、肾病综合征等。HDL-C含量过高(如超过2.6mmol/L),也属于病理状态,常被定义为高HDL血症,可分为原发性和继发性两类。原发性高HDL血症的病因可能有CETP缺损、HL活性降低或其他不明原因。继发性高HDL血症病因可能有运动失调、饮酒过量、慢性中毒性疾病、长时间的需氧代谢、原发性胆汁性肝硬化、治疗高脂血症的药物引起及其他不明原因。总之,CETP及HL活性降低是引起高HDL血症的主要原因。
(四)LDL-C测定
1.方法
血清LDL-C水平随年龄增加而升高。高脂、高热量饮食、运动少和精神紧张等也可使LDL-C水平升高。国外LDL-C测定以往由于没有准确测定的方法学,故常采用Friedewald公式计算,即LDL-C=TC(HDL-C(TG/2.2(以mg/dl计)或LDL-C=TC(HDL-C(TG/5(以mg/dl计)。该公式计算结果的使用是有条件的:当血清中存在CM;血清TG水平(4.52mmol/L(400mg/dl)时;血清中存在异常(脂蛋白时(III型高脂蛋白血症)不应采用公式计算。需要指出的是TG影响因素多,加之计算还受TC、HDL-C测定准确性的影响,在血脂水平异常条件下,尤其是在国内实验室不经实际测定而直接通过公式计算出LDL-C含量是不可信的,应该以实际测定的数据为依据。目前建议用匀相测定法作为临床实验室测定血清LDL-C的常规方法。
2.临床意义
由于LDL-C是冠心病的危险因素,所以最多用于判断是否存在患冠心病的危险性,也是血脂异常防治的首要靶标。LDL-C升高还可见于家族性高胆固醇血症、家族性Apo B缺陷症、混合性高脂血症、糖尿病、甲状腺功能低下、肾病综合征、梗阻性黄疸、慢性肾功能衰竭、Cushing's综合征、妊娠、多发性肌瘤、某些药物的使用等。LDL-C降低可见于家族性无β或低β-脂蛋白血症、营养不良、甲状腺功能亢进、消化吸收不良、肝硬化、慢性消耗性疾病、恶性肿瘤、Apo B合成减少等。
(五)LP(a)测定
1.方法
血清LP(a)浓度主要由基因控制,不受性别、年龄、体重、适度体育锻炼和降胆固醇药物的影响。LP(a)在动脉粥样硬化(AS)和血栓形成两者之间起一个桥梁作用。现在大多数的研究结果,都认为Lp(a)浓度的增加是AS性心血管疾病的一个独立的危险因素。目前建议免疫浊度法作为临床实验室测定血清Lp(a)的常规方法,首选免疫透射比浊法(immunoturbidimetry,ITA)法,其次为免疫散射比浊法(immunonephelometry,INA)。
2.临床意义
人群中呈偏态分布,一般以300mg/L以上作为病理性增高。Lp(a)升高见于急性时相反应如急性心肌梗死,外科手术,急性风湿性关节炎,妊娠等。在排除各种应激性升高的情况下,Lp(a)被认为是AS性心脑血管病及周围动脉硬化的一项独立的危险因素。高LP(a)伴LDL-C增加的冠心病患者心肌梗死发生危险性显著高于LDL-C正常者。冠状动脉搭桥手术或冠脉介入治疗后,高Lp(a)易引起血管再狭窄。此外,Lp(a)增高还可见于终末期肾病、肾病综合症上型糖尿病、糖尿病肾病、妊娠和服用生长激素等,此外接受血透析、腹腔透析、肾移植等时Lp(a)都有可能升高。
(六)Apo AI和 Apo B测定
1.方法
Apo AI是HDL的主要载脂蛋白,临床常规测定的ApoB指的是ApoB100。目前建议免疫浊度法作为临床实验室测定血清Apo AI、Apo B的常规方法,首选ITA法,其次为INA法。血清Apo AI、Apo B参考范围:成人Apo AI约为1.20~l.60 g/L,Apo B约为0.80~1.20g/L。
2.临床意义
Apo AI降低主要见于I、IIa型高脂血症、冠心病、脑血管病、感染、血液透析、慢性肾炎、吸烟、糖尿病、药物治疗、胆汁郁积阻塞、慢性肝炎、肝硬化等。Apo AI降低是冠心病危险因素。家族性高TG血症患者HDL-C往往偏低,但Apo AI不一定低,不增加冠心病危险;但家族性混合型高脂血症患者Apo AI与HDL-C却会轻度下降,冠心病危险性高。此外,Apo AI缺乏症(如 Tangier病)、家族性低a脂蛋白血症、鱼眼病等血清中Apo AI与HDL-C极低。Apo AI升高主要见于妊娠、雌激素疗法、锻炼、饮酒。
Apo B升高主要见于冠心病、IIa、IIb型高脂血症、脑血管病、糖尿病、妊娠、胆汁梗阻、脂肪肝、吸烟、血液透析、肾病综合症、慢性肾炎等。流行病学与临床研究已确认,Apo B增高是冠心病危险因素。多数临床研究指出,Apo B是各项血脂指标中较好的动脉粥样硬化标志物。冠心病、高Apo B血症的药物干预实验结果表明,降低Apo B可以减少冠心病发病及促进粥样斑块的消退。Apo B降低主要见于I型高脂血症、雌激素疗法、肝病、肝硬化、锻炼、药物疗法及感染等。
八、血脂测定的标准化
血脂测定的标准化是保证测定结果准确可靠的基础,要求实验室之间对血脂项目的测定结果具有可比性,要达到规定的准确度,标准化工作的核心是量值溯源。即在建立一个可靠的参考系统作为准确性基础的情况下,通过标准化计划将准确性转移到常规测定中去,使常规测定结果可溯源到参考系统所提供的准确性基础上来。
(一)血脂测定的参考系统
目前美国已建立较完整的TC、TG测定的参考系统。其决定性方法都是由美国国家标准与技术研究所(NIST)建立的核素稀释-质谱法(ID-MS法),一级参考物质分别为NIST的SRM911b和SRM1595(三软脂酸甘油酯),参考方法分别为美国疾病与控制中心(CDC)改进并维持的ALBK法和二氯甲烷-硅酸-变色酸显色法,二级参考物质有NIST的SRM909、SRM1951a、CAP RM026及CDC的多种冰冻血清.HDL-C、LDL-C目前暂没有决定性方法和一级参考物质,只有参考方法和二级参考物质,参考方法为超速离心结合ALBK法,二级参考物质为CDC冰冻血清、NIST SRM1951a及CAP RM 026。Apo AI、Apo B和Lp(a)测定的标准化问题非常复杂,也是目前国际上比较关注的问题。1989年国际临床化学与分子生物学联合会(IFCC)就成立了以美国西北脂类研究室(NWLRL)牵头的载脂蛋白测定标准化委员会,主要致力于ApO AI和Apo B参考物质SP-01(冻干血清)、SP3-07(冰冻血清)的研究。Apo AI、Apo B和Lp(a)目前尚无公认的决定性方法与参考方法,仅CDC建立了一个Apo AI测定的HPLC-MS候选决定性方法。IFCC于1995年和1998年连续成立了2届 Lpa(a)测定标准化工作组[WG Lp(a)],主要工作是制备Lp(a)的推荐(二级)参考物质[Lp(a)PRM-SRM 2B],现已被世界卫生组织(WHO)认可与接受。表5为目前国内外公认的血脂与脂蛋白分析参考系统。
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